敲减miR-145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用

摘要

目的探讨敲减miR-145对骨髓间充质干细胞(BMSC)修复大鼠盆底功能障碍(PFD)的影响。方法分离大鼠BMSC,并鉴定;将miR-NC或miR-145-shRNA慢病毒载体转入BMSC后,采用CCK-8法检测细胞活力。将32只大鼠按照随机对照表法分为对照组(Con)、PFD组、miR-NC治疗组(miR-NC)和miR-145-shRNA治疗组(miR-145-shRNA)。通过阴道扩张法建立PFD大鼠模型,miR-NC和miR-145-shRNA组大鼠分别给予注射已转染miR-NC和miR-145-shRNA慢病毒载体的BMSC,14 d后,进行尿流动力学(膀胱容积、排尿时膀胱内压、漏尿点压)测试,并用western blot法检测各组大鼠盘底支持组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和弹性蛋白(Elastin)的表达水平。结果成功分离大鼠BMSC;与miR-NC组比较,miR-145-shRNA组BMSC的细胞活力明显增强(P<0.001)。与Con组比较,PFD组大鼠膀胱容积、排尿时膀胱内压、漏尿点压以及盘底支持组织中CollagenⅠ和Elastin的表达水平均降低(均P<0.01);与PFD组比较,miR-NC组和miR-145-shRNA组大鼠中上述指标均增加(均P<0.05),且miR-145-shRNA组优于miR-NC组(均P<0.05)。结论敲减miR-145能增强BMSC对大鼠盆底功能障碍的修复作用。