中华眼镜蛇毒膜毒素诱导膀胱癌细胞凋亡的检测

摘要

目的 研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT-12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法.方法 MT-12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoeehest 33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率.结果 3种形态学检测方法均能观察到细胞凋亡的形态学变化.3μg/Ml MT作用2、4、8、12、24 h和36 h,双染法流式细胞术检测的细胞凋亡率分别是46.94%、51.2%、28.85%、20.43%、6.03%和5.19%,阴性对照组凋亡率为0.77%.DNA电泳未能检测到细胞凋亡的DNA ladder.结论 MT-12能诱导体外培养的BIU-87细胞凋亡,且具有时间依赖性.透射电镜观察凋亡细胞的形态特征最可靠.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡,其特异性、敏感性、重复性和准确性高.