PBRM1缺失通过TNF-α/exosome信号轴促进肾癌细胞PD-L1分泌

摘要

目的探讨PBRM1和PD-L1在肾癌患者组织中的表达相关性以及PBRM1调控PD-L1的分子机制,为肾癌患者免疫治疗筛选提供实验数据。方法免疫组化检测PBRM1和PD-L1的蛋白表达。TCGA数据库分析PBRM1和PD-L1 mRNA表达及与患者生存相关性。使用exoEasy Maxi Kit提取外泌体,免疫印迹检测外泌体生物标志物CD63和CD9的表达,并用透射电子显微镜鉴定其生物学形态;免疫印迹检测IFN-γ、IL-6和TNF-α不同因子处理对肾癌细胞PD-L1的诱导表达。结果PBRM1在肾透明细胞癌肿瘤中的组织表达量显著低于癌旁组织(P<0.001),患者肿瘤组织PBRM1表达缺失率高达76.4%。肾透明细胞癌组织芯片免疫组化和TCGA数据库结果显示PBRM1表达与PD-L1表达没有相关性,TCGA数据库及分子生物学实验证实PBRM1突变后激活TNF-α/exosome信号通路增加PD-L1蛋白含量,并包裹于外泌体中被运输到细胞外。结论肾癌组织PBRM1与PD-L1蛋白表达无相关性,但PBRM1突变导致炎症信号通路激活,诱导细胞表达PD-L1,并被包裹于外泌体分泌到细胞外,影响肾癌免疫治疗响应。