HIF-1α抑制剂YC-1对人骨肉瘤细胞Saos2和U2-OS增殖和凋亡的影响

摘要

目的:应用缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)抑制剂YC-1处理人骨肉瘤细胞Saos2和U2-OS,观察不同药物浓度对人骨肉瘤细胞系Saos2和U2-OS细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响及其机制.方法:人骨肉瘤细胞系Saos2和U2-OS分对照组和实验组.对照组细胞1％氧气浓度低氧培养,实验组细胞施加HIF-1α抑制剂YC-1干预,设浓度梯度.CCK-8法检测不同药物浓度对Saos2和U2-OS细胞活力及增殖的影响;流式细胞术检测YC-1对Saos2和U2-OS细胞周期和凋亡的影响;Western blot对FXR1、G3BP1、APAF1、Cleaved Caspase-3蛋白的表达进行相对定量分析.结果:CCK-8检测结果显示,YC-1对人骨肉瘤Saos2和U2-OS细胞有显著的增殖抑制作用,且呈明显的剂量依赖效应.不同浓度的YC-1处理细胞后,均可使各处理组G1期细胞增多,S期细胞减少,且呈剂量依赖效应(P<0.05).不同浓度的YC-1处理细胞后,与对照组相比,各实验组FXR1、G3BP1、APAF1蛋白表达显著下降(P<0.05),而Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增高(P<0.05).结论:YC-1可以将人骨肉瘤细胞株Saos2和U2-OS细胞阻滞于G1期,影响细胞周期进程,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.HIF-1α对人骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响可能是通过上调FXR1、G3BP1、APAF1的表达而实现,而YC-1抑制了HIF-1α的表达从而使Cleaved Caspase-3的表达增高诱导细胞凋亡.HIF-1α及FXR1、G3BP1、APAF1、Cleaved Caspase-3有望成为骨肉瘤治疗的新靶标.