转入pSVPoMcat微基因的雪旺氏细胞在鼠脊髓内存活及基因表达

摘要

目的 探讨pSVPoMcat微基因修饰的雪旺氏细胞在鼠脊髓内存活及基因表达。方法 将3～4月龄的胎儿雪旺氏细胞（Schwann.cell,SC）以1×106密度在培养皿中培养24～48h,用阳离子脂质体介导技术将带有人Po-5’-flanking介导的髓鞘碱性蛋白微基因（pSVPoMcat）的质粒DNA导入这些培养的SC。3～5天后,将经转基因的SC（2.5×105 cells/ul）移植到半横断损伤的成鼠脊髓中。术后12周,对实验3组动物进行S-100蛋白,MBP免疫细胞化学染色及DIG标记的hMBPE2cRNA探针的原位杂交测定。结果 采用脂质体对体外培养的SC的基因转染率可达68％;3月后,pSVPoMcat修饰的SC在宿主体内仍存活并表达外源基因。结论 SC是表达外源性基因的良好载体细胞,而阳离子脂质体是转基因的有效介导物,pSVPoMcat微基因表达产物对SC的生长有促进作用。它们为脊髓损伤的基因治疗提供了可行途径。