苏云金杆菌毒性质粒在蜡状芽胞杆菌群间的水平转移

摘要

以苏云金芽胞杆菌KT0为质粒供体菌,在液体环境中与蜡状芽胞杆菌组成员菌(Bacillus cereus sensu lato group strains)发生接合转移.对所筛选到的接合转移子进行了质粒稳定性检测、PCR验证以及供、受体菌染色体背景RAPD图谱分析.不同培养基中质粒转移率数据表明:在人工LB培养基及灭菌牛乳中,质粒pHT73均能以不同频率转移至蜡状芽胞杆菌组受体菌,并且在牛乳中转移活性更高,最高可达4.8×10-4 cfu/donor.获得质粒的受体菌同时具备了质粒所编码基因功能,产生其编码的杀虫晶体蛋白.SDS-PAGE电泳和光镜结果显示转化菌在得到外源质粒pHT73后,能产生由cry1Ac基因编码的 130 ku蛋白Cry1Ac,在芽胞期能形成稳定的菱形晶体.