ArlR反应调节蛋白在表皮葡萄球菌不同生长期表达的检测

摘要

表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)是寄居在人体和黏膜表面的条件致病菌,因可在医疗植入材料表面形成生物膜(biofilm)而具有致病性.细菌双组分信号转导系统可调控生物膜形成,但其调控机制在SE中研究甚少.本课题对adRS双组分信号转导系统的反应蛋白ArlR在细菌不同生长期的表达情况进行初步研究.首先构建ArlR原核表达质粒,用纯化重组ArlR免疫小鼠,获得多克隆抗-ArlR抗体,免疫Dot方法检测结果显示小鼠抗-ArlR血清效价>1:100 000.进一步采用蛋白免疫印迹法检测ArlR在SE 1457野生株不同生长期中的表达水平,结果显示,ArlR在2 h表达量较低,到4 h达高峰,6～10 h表达量较4 h降低.利用反转录实时荧光定量聚合酶链反应检测arIR基因在不同生长期的转录水平,结果显示相应时间点ArlR蛋白表达水平与arlR基因转录水平一致.本研究结果为后期研究双组分信号转导系统arlRS对SE生物膜形成的影响奠定基础.