多种探针的 RT-PCR 检测 H5N1病原体方法的建立及应用

摘要

目的：探究多种探针的RT‐PCR检测 H5N1病原体方法的建立及应用。方法：分析Genbank数据库的基因序列，针对保守区分别设计并合成两对特异性引物（P1／P2，P3／P4）。通过对扩增条件的优化，建立了检测两种病毒的快速双重PCR方法。结果：合适引物浓度为P1／P2为0．32μmol／L ，P3／P4为0．96μmol／L。双重检测的最小病毒核酸量为2ng／μl ，H5N1病原体混合液在相对应位置出现特异性条带，而其他病毒及空白对照均未出现条带。结论：多种探针的RT‐PCR检测 H5N1病原体具有敏感性高、特异性强等优点，对于禽流感的预防和控制具有积极的作用。