人穿孔素C肽段的单克隆抗体和免疫血清的制备和鉴定

摘要

目的 :制备人穿孔素特异性单克隆抗体和免疫血清。　方法 :利用基因重组技术获得穿孔素 (PFP) C端 12 5个氨基酸的肽段免疫 Balb/ c小鼠和家兔。经取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并用 Western印迹和免疫组化法鉴定所制备的单克隆抗体。　结果 :获得 4个稳定的分泌抗 rh PFP- C的杂交瘤细胞株 ,腹水抗体的 EL ISA滴度为 1∶ 3.2× 10 3～ 1∶ 6 .4× 10 6。兔免疫血清的滴度为 1∶ 3.2× 10 4。　结论 :利用重组人穿孔素肽段可制备出高特异性、高滴度的单克隆抗体和免疫血清。