胚脑组织中VLDL受体Ⅱ型的克隆,表达及其对VLDL结合能力的测定

摘要

目的探讨极低密度脂蛋白(VLDL)受体亚型变化在胚胎发育中的生物学意义.方法利用RT-PCR技术检测胚胎不同组织中VLDL受体亚型mRNA的分布,然后从人胚胎脑组织中克隆VLDL受体Ⅱ型(VLDLRⅡ)的全长cDNA,构建了VLDLRⅡ型真核表达载体,将其导入ldl-A7细胞,经G418筛选获得稳定表达Ⅱ型受体的ldl-A7细胞.测定这些细胞与荧光染料DiI标记的VLDL结合能力.结果VLDLRⅡ型与VLDLR Ⅰ型的配体结合能力存在明显差异,Ⅱ型受体的结合能力仅为Ⅰ型受体的50%左右.结论提示VLDLR亚型的功能差异可能在胚脑发育过程中具有独特的生物学意义.