以多药耐药基因为靶标的siRNA对耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡的影响

摘要

目的:研究应用以多药耐药相关蛋白(MRP)基因为靶标的siRNA(small interference RNA)抑制相应蛋白表达后,耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡率的改变。方法:通过脂质体将以MRP基因为靶标的siRNA(100μmol/L)转入柔红霉素(DNR)0.8、1.6、3.2、6.4、12.8μg/mL处理的肺癌耐药细胞株SW1573/R20;阿霉素(ADM)1.6、3.2、6.4、12.8、25.6μg/mL处理的白血病耐药细胞株K562/ADM;顺铂(DDP)0.125、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/mL处理的鼻咽癌耐药细胞株CNE2/DDP;以单纯化疗处理组和未处理组为对照。于转染后24、48、72h,用MTT法检测各组细胞生长抑制率,算出各细胞IC50。转染siRNA联合IC50剂量化疗处理6 h后流式细胞仪检测各细胞凋亡率和死亡率,24 h后RT-PCR检测相应基因mRNA表达水平,48 h后检测MRP蛋白表达率。结果:以MRP为靶标的siRNA明显抑制各肿瘤细胞靶基因蛋白和mRNA的表达,与未处理组相比均有统计学差异(P<0.05);转染以MRP为靶标的siRNA后,耐药肿瘤细胞对化疗药物敏感性明显增强,IC50明显降低,细胞凋亡率明显增加,与单纯化疗组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:以MRP基因为靶标的siRNA,通过降低靶基因mRNA和蛋白表达,明显增加耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡率。