液相色谱-高分辨串联质谱法检测牛奶中A1和A2β-酪蛋白

摘要

建立一种基于液相色谱-高分辨串联质谱(LC-HRMS/MS)方法检测牛奶中A1和A2β-酪蛋白.采用等电点沉淀法从牛奶中提取酪蛋白,经胰蛋白酶酶解后,将酶解产物进行LC-HRMS/MS分析,选择含有差异氨基酸残基(第67位)的肽段作为特征肽段对A1和A2β-酪蛋白进行区分.采用Tris-HCl缓冲溶液充分溶解酪蛋白,在酶解反应体系中添加乙腈以提高酶解效率.采用高分辨质谱和串联质谱技术,进一步排除杂质产生的干扰信号.采用该方法对市售4种普通牛奶和2种A2牛奶进行检测,结果表明,普通牛奶中A1β-酪蛋白的含量约为A2β-酪蛋白含量的2～4倍,个别A2牛奶样品含微量A1β-酪蛋白.该方法可检测牛奶中的A1和A2β-酪蛋白,具有高可靠性、高灵敏度等优点,为A2奶源筛选和质量控制提供支持.