丹参酮ⅡA对人肝癌HepG2细胞增殖和迁移的抑制作用及促凋亡作用

摘要

目的 :观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用及诱发细胞发生迁移和凋亡作用,探讨其可能的作用机制.方法 :常规体外培养人肝癌HepG2细胞,实验分为空白组和不同浓度TanⅡA组.不同浓度TanⅡA组分别加入终浓度为0.5、1.0、2.0、5.0和10.0 mg·L-1 TanⅡA,继续培养24 h.倒置显微镜观察各组HepG2细胞形态表观,M T T法检测各组HepG2细胞增殖抑制率,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,RT-PCR法检测各组HepG2细胞中核转录因子κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA的表达水平,流式细胞术检测各组不同细胞周期HepG2细胞百分比,TUNEL法检测各组HepG2细胞凋亡率.结果 :不同浓度TanⅡA组细胞形态表观均发生改变.与空白组比较,1.0和2.0 mg·L-1 TanⅡA组HepG2细胞体积缩小,连接疏散,生长状态差,1.0、2.0、5.0和10.0 mg·L-1 TanⅡA组HepG2细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性.细胞划痕实验检测,与空白组比较,2.0和5.0 mg·L-1 TanⅡA组HepG2细胞迁移数减少.RT-PCR法检测,与0.5 mg·L-1 TanⅡA组比较,1.0、2.0和5.0 mg·L-1 TanⅡA组HepG2细胞中MMP-9与NF-κB mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01).流式细胞术检测,与空白组比较,1.0、2.0、5.0和10.0 mg·L-1 TanⅡA组S期HepG2细胞百分比降低(P<0.05),G0/G1和G2期细胞百分比升高(P<0.05).TUNEL法检测,与空白组比较,0.5、1.0、2.0、5.0和10.0 mg·L-1 TanⅡA组HepG2细胞凋亡率升高(P<0.05或P<0.01).结论 :不同浓度TanⅡA均可明显抑制人肝癌H epG2细胞的增殖与迁移,并诱发细胞凋亡,且呈一定的剂量依赖关系,其机制可能与抑制H epG2细胞中NF-κB和MMP-9 mRNA表达有关.