PHOⅠ信号肽在毕赤酵母中引导分泌表达天然N-端rBPTI

摘要

目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达天然N-端rBPTI.方法:将PHOⅠ/bpti基因克隆到真核表达载体pPICZα,电转化毕赤酵母菌株X-33.结果:构建了含PHOⅠ/bpti基因的表达质粒,并在X-33中分泌表达rBPTI.用胰蛋白酶抑制实验筛选出表达rBPTI的工程菌.表达上清经阳离子交换层析分离纯化为单一组份,SDS-PAGE显示相对分子质量为6 500.结论:PHOⅠ信号肽在毕赤酵母中成功地诱导分泌表达了具有正确N-端氨基酸序列的rBPTI.