林蛙油水溶性蛋白质的制备与相对分子量测定

摘要

研究了林蛙油水溶性蛋白的制备、含量测定、相对分子量测定与抑菌活性初探.采用经典水提法对林蛙油水溶性蛋白进行制备,通过优化缓冲液pH、提取时间、提取次数与料液比,探索最佳制备工艺;以小牛血清为标准品,采用考马斯亮蓝法对含量进行测定;应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子质量;最后,采用纸片法考察了林蛙油水溶性蛋白对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌四种细菌以及白色念珠菌、酿酒酵母两种真菌的抑菌活性.结果表明,最佳制备工艺条件为磷酸盐缓冲溶液的pH为6.5,提取时间为3h,最佳的提取次数为2次,料液比在1∶100时,林蛙油中水溶性蛋白质收率为9.78％;林蛙油中总蛋白的含量为C=0.339 mg/mL;相对分子量为56 kDa左右;制备得到的林蛙油水溶性蛋白对上述六种菌种无抑制活性.本实验研究为林蛙油资源的进一步开发提供了实验依据.