大豆热激蛋白基因HSP17.4的耐热功能鉴定

摘要

为研究小热激蛋白基因HSP17.4在大豆热生物胁迫耐受过程中的作用,利用农杆菌介导法,将植物过表达载体pCPB-HSP 17.4和RNA干扰表达载体pCPB-HSP17.4-RNAi导入受体大豆JN18中.经PCR检测,获得To代阳性植株13株,T1代阳性植株26株,T2代阳性植株39株.T1、T2代转基因植株Southern blotting结果显示,目标基因以单拷贝形式整合到基因组中.荧光定量PCR结果显示,HSP17.4基因在转化植株的叶、茎中均有表达.在42℃高温胁迫下,与未转化植株相比,T1、T2转过表达植株叶片中相对表达量分别为未转化植株的813％和793％,转RNAi表达植株叶片中相对表达量分别为未转化植株的49.77％和52.81％.耐高温鉴定结果表明,转过表达HSP17.4基因提高了植株的耐高温能力.