猪Motilin和Ghrelin基因克隆及其真核载体的构建与体外表达

摘要

目的:克隆Motilin和ghrelin基因,构建表达Motilin的pDsRed-Express-motilin载体和表达ghrelin的pEGFP-ghrelin载体,并检测它们能否在真核细胞中表达及表达量的变化。方法:用RT-PCR方法分别从猪小肠和胃的cDNA上扩Motilin和ghrelin基因片段,并分别克隆到pDsRed-Express-N1载体和pEGFP-N1载体上,用脂质体法转染RIBS2细胞系(来自于肾),并用半定量RT-PCR和荧光成像法检测目的基因的表达。结果:构建了表达Motilin的pDsRed-Express-motilin和表达ghrelin基因的pEGFP-ghrelin载体,并能在真核细胞中超表达目的基因,为进一步相关研究提供了实验基础。