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沉默热休克蛋白5可增敏青蒿琥酯诱导肝癌细胞铁死亡

     

摘要

目的:探讨热休克蛋白5(heat shock protein family A member 5,HSPA5)对青蒿琥酯诱导人肝癌SMMC-7721细胞株化疗敏感性的影响.方法:用不同浓度青蒿琥酯处理SMMC-7721细胞,CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳实验浓度.将SMMC-7721细胞按以下分组处理:对照组、青蒿琥酯组、青蒿琥酯+去铁胺组,用流式细胞术检测细胞内脂质来源活性氧水平;试剂盒检测细胞内丙二醛水平.用包装HSPA5干扰或过表达质粒的慢病毒感染SMMC-7721细胞,qRT-PCR和蛋白质印迹法分别测定转染后HSPA5 mRNA和蛋白表达;CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测细胞内丙二醛水平.结果:青蒿琥酯浓度为20μmol/L时,SMMC-7721细胞达到半数致死量,为最佳实验浓度;流式细胞术结果显示,青蒿琥酯处理的细胞内脂质来源活性氧水平、丙二醛水平明显升高,去铁胺可抑制青蒿琥酯导致的细胞内脂质来源活性氧和丙二醛升高(均P<0.05);经过青蒿琥酯处理的HSPA5干扰组细胞活性水平明显低于未干扰组,丙二醛水平明显高于未干扰组(均P<0.05).结论:干扰HSPA5可能增强人肝癌SMMC-7721细胞株对青蒿琥酯的化疗敏感性.

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