与软骨细胞共培养促进BMSCs分化为软骨细胞

摘要

目的:将兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)和关节软骨细胞在离心管内聚集共培养获取软骨细胞,并与全软骨细胞比较离心管内培养的差异。方法:取兔骨髓和软骨,分离BMSC和软骨细胞分别进行培养,用阿利新蓝染色、番红花O-亮绿染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定软骨细胞;用免疫荧光法检测CD44、CD105、CD34、CD45的表达鉴定BMSC。取3×10~7/m L第3代BMSC和1×10~7/m L原代软骨细胞按3∶1比例混于离心管内,为共培养组;另将4×10~7/m L原代软骨细胞移入离心管内培养,作为软骨细胞组。培养4周,每周收集细胞上清液,检测细胞糖胺聚糖、Ⅱ型胶原含量。结果:软骨细胞组与共培养组在培养的1~4周中细胞大体形态、组织学变化无明显差别;两组细胞1~4周分泌糖胺聚糖比较差异无统计学意义(P>0.05),Ⅱ型胶原量在第1周时有差异,后3周时无统计学差异(P>0.05)。结论:BMSC和软骨细胞离心管内聚集共培养可诱导BMSC分化为软骨细胞,其数量和质量与单纯软骨细胞效果同等。