BMSCs与软骨细胞共培养复合BMG修复关节软骨缺损的实验研究

摘要

目的:探讨BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养及复合自体“双相”骨基质明胶(BMG)修复关节软骨缺损的可行性。
　　方法:1、贴壁离心法分离兔BMSCs，酶消化法结合组织块法获取肋软骨细胞，体外扩增，形态学观察，绘制生长曲线、检测BMSCs的表型，组织学鉴定软骨细胞。2、取两种细胞的P2代随机分为三组:A为共培养组，B为高浓度单纯软骨细胞组，C为低浓度单纯软骨细胞组，体外培养2周后比较各组培养液中GAG含量的差异。3、改良的Urist法制备兔自体“双相”BMG支架，体外与共培养细胞复合培养3天行电镜观察。4、制备36只实验兔膝关节软骨缺损模型，随机分为三组:实验组植入共培养细胞-BMG复合体，对照组植入单纯BMG支架，空白组不作特殊处理。术后1、2、3个月取材行大体、组织学观察并评分行统计学分析。
　　结果:
　　1、贴壁离心法分离的BMSCs生长良好，酶消化法结合组织块法获得的肋软骨细胞生物活性良好。
　　2、2周后A组培养液的GAG含量明显多于B、C组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　3、扫描电镜示“双相”BMG呈多孔隙网络状结构，细胞黏附其表面，状态良好。
　　4、术后3个月实验组软骨缺损由透明软骨基本修复，对照组和空白组软骨缺损由纤维组织部分修复。实验组在各时期的评分与对照组及空白组比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），表明其修复效果优于其它两组。
　　结论:BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养，可被诱导分化为软骨细胞，未出现明显排斥反应，减少了软骨细胞的用量;共培养细胞与自体“双相”BMG复合可有效地将关节软骨缺损修复。