大豆抗病基因同源序列的克隆与分析

摘要

本研究根据已知抗病基因的NBS保守序列区设计 4对简并引物和 1对特异引物 ,以大豆农家种兴县灰布支黑豆为材料 ,应用PCR方法获得了 11条来自基因组DNA的RGA序列和 2条来自cDNA的RGA序列 ,序列长度在 5 0 0 - 6 33bp之间 ,其中 8条来自基因组DNA和 2条来自cDNA的RGA序列已在GeneBank登录 (登录号为 :AF30 5 388- 30 5 392 ,AY0 0 8380 - 0 0 8382 ,AY0 4 886 3-AY0 4 886 4)。 13条序列都不同程度的含有NBS保守区的P -环 (GGVGKTT)、kinase - 2 (VLDD)、kinase - 3(GSRII)及跨膜区GLPL等特征序列结构 ,由此推导出的氨基酸序列同已知抗病基因L6、RPM 1、SRPS2、N编码的氨基酸序列表现出从 2 5 % - 42 %的同源性。本研究克隆的RGA序列根据其相似性可分为 4组 ,与已发表的大豆抗病类似基因 (RLG)具有较高的相似性。