加压毛细管电色谱手性配体交换法对游离亮氨酸异构体分离的研究

摘要

以反相C18为固定相,通过对流动相中的手性选择体、流动相组成与pH值及操作电压等条件的考察,成功建立了毛细管电色谱(CEC)手性配体交换法分离游离亮氨酸异构体的方法.优化的色谱条件:C18 反相毛细管柱;以2 mmol/L天冬氨酰苯丙氨酸甲酯为手性选择体,Cu2+为配体离子,流动相为20 mmol/L乙酸缓冲液(pH 5.5),5%(体积分数)的甲醇为有机改性剂;流速为0.02 mL/min;操作压力为 6.9×106 Pa;检测波长为UV 280 nm;工作电压+5 kV;室温.两异构体可在15 min内基线分离,检出限为10 μmol/L(S/N＝3),并在0.05 ～1.5 mmol/L范围内呈良好的线性关系,日间、日内精密度均小于3.5%.