高效液相色谱法同时测定水果蔬菜中L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸、脱氢抗坏血酸及总维生素C的含量

摘要

建立了同时测定水果或蔬菜中L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸、脱氢抗坏血酸及总维生素C含量的高效液相色谱分析方法.用偏磷酸提取水果或蔬菜样品中L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸和脱氢抗坏血酸,提取液中的L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸可直接进行检测,脱氢抗坏血酸在磷酸钠溶液中(pH 7.0～7.2)用L-半胱氨酸还原成L-抗坏血酸,之后测定以L-抗坏血酸表达总维生素C含量,脱氢抗坏血酸含量由总维生素C含量减去L-抗坏血酸含量获得.采用C18色谱柱分离,以甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH 3.5)为流动相,在245 nm下检测,外标法定量.结果表明,在0.5～50 mg/L的浓度范围内L-抗坏血酸和D-异抗坏血酸的线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限分别为42.0,19.4μg/kg,脱氢抗坏血酸的检出限为262 μg/kg.低、中、高3个浓度的加标水平下,3种物质的加标回收率为82.8％～111.3％,相对标准偏差(RSD)小于15％.该方法操作简单,灵敏度高,准确性好,适用于水果和蔬菜中维生素C的测定.