长萼堇菜叶蛋白水解物的制备及其活性分析

摘要

以长萼堇菜(Viola inconspicua Blume)为材料,优选碱提酸沉法参数,提取其叶蛋白;采用酶法制备叶蛋白水解物;利用超滤法分离叶蛋白水解物组分,分析叶蛋白水解物的抗氧化活性,并对叶蛋白水解物组分进行固相萃取脱盐、HPLC分析及其对肿瘤细胞的抑制活性和对线虫寿命影响的测试。结果表明:采用料液比、碱提pH和酸沉pH分别为1∶9、10.0和4.5的参数组合可稳定提取长萼堇菜叶蛋白;优选的3种蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶)均能有效将水解物主要酶解为相对分子质量小于3.3×10^3的组分,并通过超滤可有效分离出相对分子质量分别为<1×10^3(PH1)、1×10^3~<3×10^3(PH2)和≥3×10^3(PH3)的3个组分;长萼堇菜蛋白水解物中PH1组分的抗氧化活性和抑肿瘤细胞活性优于其他组分;PH1和PH2延长线虫寿命的效果相近,都优于PH3。可见,长萼堇菜叶蛋白水解物组分PH1更具应用开发价值。