地塞米松诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡实验研究

摘要

目的 探讨地塞米松体外诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的实验方法。方法 取昆明小鼠,分离其脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,实验组加入地塞米松,使终浓度为10-8、10-6、10-4、10-2mol/L。培养17h,采用流式细胞法观察其凋亡率,凝胶电泳法观察其DNA ladder,蛋白质印迹法观察凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-2的表达。同时设立空白对照组和新鲜淋巴细胞对照组。结果 流式细胞术观察到给药组凋亡率明显高于正常组,且10-2mol/L的地塞米松组诱导凋亡率最高;DNA凝胶电泳图图谱呈现典型的凋亡DNA ladder;蛋白质印迹分析显示出现凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-2相应表达变化。而未加入地塞米松对照组凋亡较少,新鲜淋巴细胞几乎未见细胞凋亡。结论 建立诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡模型的地塞米松的最佳浓度为10-2mol/L。