碱性脂肪酶的纯化及酶学性质研究

摘要

对菌株L-9发酵产的低温碱性脂肪酶进行了分离纯化,菌体发酵液经过硫酸铵沉淀、DEAE-52离子交换和Sephadex G-75凝胶过滤等步骤处理,经电泳检测达到电泳纯。对菌株L-9所产脂肪酶进行酶学性质研究,该酶的最适温度和p H为30℃,p H 9.0,该酶在10℃、15℃、20℃和25℃时分别保持63%、66%、74%和95%的活性。洗涤剂、柠檬酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨酸和Na Cl等溶剂对该脂肪酶的激活作用较强;Triton X-100,Tween-20,Tween-80,SDS及皂角苷等溶剂对该脂肪酶有微弱的抑制作用;该脂肪酶对氧化剂(过氧化氢、Na Cl O3、过硼酸钠)有较好的稳定性;碱性蛋白酶、硼砂、洗衣粉等溶剂的浓度对脂肪酶的活性影响较大,其高浓度抑制脂肪酶活性,低浓度促进脂肪酶活性。结果显示,菌株L-9所产脂肪酶为低温碱性脂肪酶,具有较好的洗涤剂添加剂方面的应用潜力。