不同传代倍数成人间充质干细胞成骨分化能力的研究

摘要

目的:观察不同传代倍数成人骨髓间充质干细胞(MSC)定向诱导分化为成骨细胞的能力,为自体MSC修复骨组织损伤的临床应用提供部分参数.方法:采用全髓直接接种法分离培养胸科手术取下肋骨骨髓,贴壁细胞达90%以上融合时消化传代.传代细胞部分以1×106/ml的细胞密度接种于含100ml/L胎牛血消(FBS)的L-DMEM的培养基中继续培养,传代;部分在培养基中添加成骨诱导剂地塞米松,β-甘油磷酸钠及抗坏血酸向成骨细胞诱导分化.如此连续传10代.结果:5代以内成人MSC成骨分化能力无显著差异(P＞0.05),以第3代最强,第6代后MSC成骨分化能力逐渐减弱.结论:不同代次的MSC诱导分化为成骨细胞的能力不同,6代以后明显减弱.做为组织工程的种子细胞,成人MSC体外培养不宜超过5代.