果蝇铁蛋白H型亚基-His融合蛋白的原核表达

摘要

铁元素是有氧生物必不可少的微量元素,过量的铁又对细胞物质具有潜在的毒性。铁蛋白(ferritin)是一种由H型和L型2种亚基组成的大分子蛋白复合物,可以结合大量的铁,使其处于非毒性且可利用的状态。H型和L型亚基分别由不同基因编码,其中铁蛋白H型亚基(Fer1HCH)具有亚铁氧化酶(ferroxidase)活性,可以将二价铁原子氧化为三价。文章为了探索Fer1HCH的结构和功能性质,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增Fer1HCH基因全长,连接至原核表达载体PET-28a,将重组质粒转入表达菌株BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导成功表达融合His标签的Fer1HCH重组蛋白;进一步检测发现该重组蛋白部分表达在上清,部分表达在包涵体。该文为进一步研究该基因的分子结构和功能奠定了基础。