番茄DNA甲基转移基因SlDRM2L的克隆及表达分析

摘要

DNA甲基化主要是通过在甲基转移酶的催化下修饰基因组DNA来响应外界环境的胁迫,是表观遗传学的重要手段之一,参与植物中DNA甲基化起始的主要DNA甲基转移酶是DRM2。文章通过美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)数据库,在番茄中发现了一个与拟南芥胞嘧啶甲基转移酶DRM2同源性较高的序列,即SlDRM2L。通过GenBank(登录号NM-001246974)获得番茄DNA甲基转移酶SlDRM2L基因的cDNA全长序列。实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)结果表明SlDRM2L在所有组织中均有表达,叶和花的表达量最高。同时利用烟草瞬时表达系统将构建的绿色荧光瞬时表达载体35S::SlDRM2L-GFP用于亚细胞定位实验,通过激光共聚焦显微镜观察可知SlDRM2L蛋白定位于细胞核中;此外,在高温条件下(39℃,4 h),番茄SlDRM2L的基因转录水平明显提高,表明SlDRM2L介导的DNA甲基化可能受高温诱导。该文为发现SlDRM2L在植物生长发育中的作用提供了相关的科学依据,为深入研究SlDRM2L的功能奠定了理论基础。