刺槐体细胞胚发生的同步化调控

摘要

为了建立一个高频率、同步化发生的体细胞胚培养系统,以二倍体刺槐为材料,对影响刺槐体细胞胚同步化发生的培养基渗透压、培养基中添加的植物生长调节剂、低温等培养环境条件以及悬浮培养结合看护培养方法进行了研究,建立了刺槐体细胞胚同步发生体系.结果表明:1)4℃低温条件下处理7d的胚性愈伤组织,最有利于刺槐体细胞胚的同步化诱导,同步化率可达37.3％;2)培养基中蔗糖质量浓度为50 g/L最适宜调控刺槐的体细胞胚同步化发生,同步化率可达35.0％;3)培养基中的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-di-chlorophenoxyacetic acid,2,4-D)质量浓度为0.1 mg/L时最适宜体细胞胚同步化的调控,体细胞胚发生的同步化率可达43.6％,同时对畸形胚的发生有较好的控制作用;4)将悬浮培养的胚性细胞用50目筛(孔径0.28 mm)过滤,将留在筛上的细胞团接种到铺有滤纸的半固体体细胞胚诱导培养基上(培养基为MS(Mu-rashige&Skoog)+-NAA(naphthylacetic acid) 0.5 mg/L+-BA(benzyladenine) 0.5 mg/L+2-吗啉乙磺酸(MES) 500 mg/L+谷氨酰胺500 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+蔗糖30 g/L-+-琼脂3 g/L),培养21 d后,球形胚大量发生,占到总胚状体数目的67.3％.本结果可为其他植物种类的体细胞胚同步化调控研究提供参考.