基于诱变和抗性突变的多杀霉素高产菌株的选育

摘要

为提高菌株发酵液中多杀霉素产量,本试验利用常温常压等离子体(ARTP)诱变、紫外(UV)诱变和抗性突变技术处理刺糖多孢菌株DS0322-3,结合高通量筛选和摇瓶发酵选育多杀霉素高产菌株.结果 显示,通过ARTP诱变和UV诱变育种,筛选获得384株突变菌株,其中有9株突变菌株的效价较原始菌株增加10％以上,且1株效价较原始菌株增加20％以上,经过ARTP诱变30 s,得到的突变菌株AR1019-4效价为547.78 mg/L,较原始菌株增加了21.88％.以ARTP诱变得到的高产突变菌株AR1019-4为出发菌株,通过抗性突变筛选技术筛选获得1152株突变株,其中13株突变菌株的效价较出发菌株增加10％以上,且2株效价较出发菌株增加15％以上,在0.5 mg/L的氯霉素平板上得到的突变菌株Chl 1215-5效价为637.12 mg/L,较出发菌株增加了16.31％;12 mg/L的庆大霉素抗性突变筛选到了突变菌株Gen 1207-8,效价为597.59mg/L,该菌株的Spinosyn D组分由10％～15％增加至30％～35％左右,经遗传稳定性试验验证,突变菌株Chl 1215-5和Gen 1207-8可稳定遗传.试验结果表明ARTP诱变、紫外诱变和抗生素突变技术对选育多杀霉素高产菌株具有重要意义.