METTL14上调miR-141的m6A修饰抑制ZEB1促进肺成纤维细胞增殖与炎症

摘要

目的:探究METTL14是否通过调控pri-miR-141的m6A修饰参与调控成纤维细胞的增殖和炎症因子分泌。方法:使用METTL14过表达慢病毒转染MRC-5细胞,采用qPCR和western blot检测METTL14和ZEB1的表达量;采用CCK-8和流式细胞术检测METTL14对MRC-5增殖和凋亡的影响;IL-2,IL6和TNF-α的ELISA试剂盒检测METTL14对MRC-5分泌炎症因子的影响;采用meRIP检测pri-miR-141上的m6A修饰位点,RIP检测pri-miR-141与METTL14的结合情况。结果:在MRC-5细胞中成功过表达METTL14基因;METTL14高表达促进MRC-5细胞增殖,抑制其凋亡,并促进MRC-5细胞分泌炎症因子;pri-miR-141上存在m6A修饰位点,且pri-miR-141能够和METTL14直接结合;METTL14高表达增加miR-141的表达量,并抑制ZEB1 mRNA与蛋白表达。结论:METTL14通过增加pri-miR-141的m6A修饰位点促进miR-141的表达,抑制ZEB1从而促进成纤维细胞的增殖和炎症因子的分泌。