硒结合蛋白1基因沉默对巨噬细胞硒蛋白表达水平的影响

摘要

目的 研究硒结合蛋白1(SBP1)对巨噬细胞中硒蛋白表达水平的影响.方法 用50μg/L佛波酯(PMA)诱导单核细胞株THP-1培养48 h分化为M0型巨噬细胞,设置空白对照组(C组,含转染试剂)、阴性对照组(NC组,含转染试剂和阴性对照引物)及沉默组(Si组,含转染试剂和SBP1 siRNA引物);细胞转染24 h后提取总RNA、48 h后提取总蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测SBP1和硒蛋白基因SEPHS2、SELENOH、TX-NRD3、GPX1、SELENOK、SELENOS、MSRB1、SELENOT、SELENOW及SELENOV mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测SBP1蛋白表达.结果 THP-1细胞经PMA诱导培养48 h后获得M0型巨噬细胞,siRNA转染后,与对照组相比,SBP1 mRNA及蛋白表达水平分别下调76％(P<0.001)和50％(P<0.05);SBP1基因沉默后的巨噬细胞中,硒蛋白SEPHS2、SELENOH、TXNRD3、GPX1、SELENOK和SELENOS mRNA表达上调(P<0.001),硒蛋白MSRB1、SELENOT和SELENOW mRNA表达下调(P<0.01);硒蛋白SELENOV mRNA表达不变.结论 SBP1基因沉默可以调节巨噬细胞中硒蛋白的表达.