白鲜皮及汉黄芩素治疗银屑病的网络药理学研究及细胞验证

摘要

【目的】通过网络药理学探讨中药白鲜皮及其主要活性成分汉黄芩素治疗银屑病靶点和机制,并进行细胞验证。【方法】通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医百科全书数据库检索白鲜皮化学成分,以口服生物利用度(OB)和类药性(DL)筛选其主要活性成分及作用靶点,在GeneCard数据库检索银屑病疾病靶点,对二者取交集得到白鲜皮潜在调控靶点。对这部分靶点进行基因富集分析,并使用STRING数据库、Cytoscape软件制作蛋白互作图,再进一步使用CytoHubba插件进行关键基因的筛选。选取调控关键基因最多的主要活性成分汉黄芩素进行细胞实验:制作HaCaT细胞银屑病样模型,确定汉黄芩素的半抑制浓度(IC50),以10%IC50干预银屑病样细胞模型,对关键基因进行实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测。【结果】白鲜皮共筛选出11种有效单体成分,共计对应106个有效靶点,银屑病包含4055个可供调控的靶点,取交集发现其中63个可能是白鲜皮治疗银屑病的潜在调控靶点。基因富集分析结果显示白鲜皮主要有效成分调控银屑病主要通过免疫与炎症相关通路。CytoHubba插件筛选出10个关键基因,主要受槲皮素、木犀草素、汉黄芩素调控。汉黄芩素进一步被作为研究对象,处理以1μg/mL脂多糖(LPS)诱导细胞4 h构建的HaCaT细胞银屑病样模型,汉黄芩素对HaCaT细胞的IC50为415μmol/L。以汉黄芩素10%IC50干预模型细胞,结果显示其可以显著提高PPARG mRNA表达,降低ESR1、HSP90AA1、IL-6、NF-κB、PTGS2、TNF-α、TP53 mRNA表达(P<0.005)。【结论】白鲜皮主要有效成分汉黄芩素可能通过调控TNF-α、IL-6、NF-κB、TP53、HSP90AA1、ESR1、PTGS2、PPARG mRNA表达,降低炎性水平,从而治疗银屑病。