紫杉醇调控NF-κB通路对FLT3-ITD突变急性髓细胞白血病细胞株MOLM-13增殖和凋亡的影响

摘要

目的:研究紫杉醇(PTX)对FLT3-ITD突变急性髓细胞白血病细胞株MOLM-13增殖与凋亡的影响及作用机制。方法:不同浓度的PTX分别作用于FLT3-ITD突变细胞MOLM-13和FLT3未突变细胞THP-1,采用CCK8法及流式细胞仪FITC/PI双标法分别检测PTX对两种细胞株增殖与凋亡的影响;采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)及western blotting法分别检测PTX对 MOLM-13 细胞株 FLT3、NF-κB 基因及蛋白表达的影响。结果:PTX 作用于 MOLM-13 细胞 24 h、48 h、72 h 的 IC_(50)分别为7.659 nmol/L、3.748 nmol/L、3.408 nmol/L,而 THP-1 细胞的 IC_(50)为 61.164 nmol/L、11.804 nmol/L、9.834 nmol/L。4 nmol/L 和8 nmol/L PTX 作用 MOLM-13 细胞 48 h 的凋亡率分别为(13.12±0.20)%、(46.27±1.48)%,与对照组[(9.95±0.48)%]相比凋亡率升高(P<0.05);4 nmol/L和8 nmol/L PTX作用THP-1细胞48 h后的凋亡率分别为(4.26±2.06)%、(8.22±0.47)%,8 nmol/L PTX处理组凋亡率比对照组[(5.26±0.83)%]高(P<0.05)。经 PTX 处理 48 h 后,MOLM-13 细胞中 FLT3、NF-κB 基因表达下调,FLT3、NF-κB、p-NF-κB 蛋白表达下调(P<0.05)。结论:与 FLT3 未突变白血病细胞株 THP-1 相比,PTX 对 FLT3-ITD 突变细胞株MOLM-13的抑制作用更为明显,且呈剂量和时间依赖性;PTX对MOLM-13细胞的作用机制可能与下调FLT3、NF-κB以及p-NF-κB 蛋白的表达,进而诱导白血病细胞发生凋亡有关。