基于网络药理学及体外实验探讨蛭岩消积方治疗肝癌的作用机制

摘要

目的:基于网络药理学探讨蛭岩消积方治疗肝癌的作用机制,并通过体外实验研究蛭岩消积方水提物对HepG2肝癌细胞的生物学作用及其机制。方法:利用网络药理学工具预测蛭岩消积方治疗肝癌的作用靶点和通路。将人肝癌细胞HepG2分为对照组(不含蛭岩消积方水提物)和不同浓度蛭岩消积方水提物组。采用CCK8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞周期,western blotting法检测细胞周期相关蛋白[CDK2、CyclinA、Cdc25A、磷酸化(p-)CHK1]及信号通路蛋白的表达。结果:利用网络药理学筛选出蛭岩消积方治疗肝癌的潜在作用靶点381个,其中关键靶点30个,KEGG富集分析结果发现潜在靶点主要富集在PI3K/AKT、乙肝、丙肝、前列腺癌、AGE-RAGE、IL-17、TNF等信号通路。蛭岩消积方水提物可降低细胞增殖活性,减少迁移和侵袭细胞数,将细胞阻滞于S期;与对照组比较,蛭岩消积方水提物中、高剂量组CDK2、Cdc25A、CyclinA蛋白表达量及p-AKT与AKT比值、p-PI3K/PI3K比值降低,p-CHK1蛋白表达量升高(均P<0.05)。结论:蛭岩消积方治疗肝癌的作用机制是多成分、多靶点、多通路共同调控的结果;蛭岩消积方水提物可能通过阻断PI3K/AKT通路抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移。