长链非编码RNA NKILA调节miR-889-3p介导肝细胞癌进展的研究

摘要

目的:探究NKILA在肝癌发展过程中的潜在作用.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测HCC组织和癌旁组织、肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L-02中NKILA和miR-889-3p的相对表达量.分别通过克隆形成和血管生成实验来评估细胞生长和肿瘤血管生成.免疫蛋白印迹用于检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白的表达.NKILA与miR-889-3p之间的联系采用荧光素酶报告基因分析.建立小鼠移植瘤模型,免疫组化检测其相关蛋白的表达.结果:miR-889-3p是NKILA的直接靶标,NKILA负向调控miR-889-3p的表达.qRT-PCR分析显示,在肝癌组织和HepG2细胞中NKILA表达明显下调,而miR-889-3p表达上调.NKILA过表达通过下调miR-889-3p而抑制HCC细胞增殖、EMT和肿瘤血管生成.体内模型显示NKILA显著降低异种移植肿瘤的体积和重量,并伴有E-钙粘蛋白的增加和VEGF的减少.此外,免疫组化实验发现单独使用NKILA可以减少血管内皮细胞标记物(CD34和CD105)的阳性表达.结论:过表达的NKILA通过下调miR-889-3p抑制HCC的发生,miR-889-3p可能是HCC患者的新治疗靶点.