人锰超氧化物歧化酶基因在大肠杆菌中的表达

摘要

目的:研究人锰超氧化物歧化酶(hMn-SOD)基因在不同大肠杆菌中的表达水平.方法:以人肝细胞株(L02)总RNA为模板,用RT-PCR扩增出hMn-SOD cDNA,构建重组质粒pSE380-MnSOD并分别转化至3种大肠杆菌DH5α、TOP10和BL21.采用SDS-PAGE和改良的连苯三酚法分别检测SOD酶蛋白及其活性.结果:hMn-SOD基因在3种大肠杆菌中都可以表达,表达量分别为菌体总蛋白质的11.9%、15.8%和30.2%.表达产物具有SOD酶活性,酶比活性分别为90.15 U/mg、114.06 U/mg和216.13 U/mg.结论:hMn-SOD基因在不同大肠杆菌中的表达水平明显不同,在BL21中表达量较高.