锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因在芽孢杆菌中的转化和表达

摘要

将来源于嗜热脂肪芽孢杆菌染色体的１．５ｋｂ Ｍｎ－ＳＯＤ基因连接到Ｅ．ｃｏｌｉ－Ｂａｃｉｌｌｕｓ穿梭载体ＰＢＥ２上，转化Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９。利用电击穿孔技术将得到的重组质粒转化野生型芽孢杆菌Ａ－４７，Ｂ－９０８，Ｍ－２２，均获得转化子。通过对转化子的形态比较，酶切鉴定和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实外源ＳＯＤ基因片断已导入受体菌中。ＳＯＤ酶活测定表明，转化子ＳＯＤ酶活显著高于野生型菌株，说明外源ＳＯＤ基因在转化子中获得表达。