硝石雄黄散对血管内皮细胞缺氧损伤的保护机制

摘要

目的:探索硝石雄黄散对血管内皮细胞缺氧损伤的保护机制。方法:采用Griess法检测中药硝石(XS)、雄黄(XH)、硝石雄黄散(XSXH)中硝酸盐(NO3-)和亚硝酸盐(NO2-)含量及各组小鼠血清一氧化氮(NO)水平;制备硝石雄黄散各组分药的小鼠血清,将人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)随机分为空白(Blank)组、缺氧(Hypoxia)组、Hypoxia+XS组、Hypoxia+XH组和Hypoxia+XSXH组,Blank常氧处理,其余组别予缺氧24 h制备细胞缺氧模型;利用小鼠血清干预HCAEC,采用四甲基罗丹明甲酯(TMRM)和线粒体超氧化物指示剂(MitoSox)检测各组HCAEC线粒体膜电位及活性氧(ROS)水平;Griess法检测各组HCAEC中NO水平及ELISA法检测ET-1、IL-6和TNF-α水平。结果:XSXH组NO2-含量高于XS组而NO3-含量较XS组低(P<0.001),XH组NO3-和NO2-含量最低(P<0.001,P<0.01);与Blank组相比,XS组、XH组和XSXH组均能提高小鼠血清NO水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001);细胞结果显示,Hypoxia组能显著降低细胞NO生物活性、升高ET-1和炎症因子(IL-6、TNF-α)水平、线粒体膜电位降低及生成大量ROS(P<0.001);与Hypoxia组相比,Hypoxia+XS组、Hypoxia+XH组和Hypoxia+XSXH组对上述指标均有明显改善(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其中Hypoxia+XSXH组作用最强,Hypoxia+XS组强于Hypoxia+XH组(P<0.05)。结论:XS、XH和XSXH均能不同程度地提高NO生物活性,通过降低ET-1水平和炎症因子水平,恢复细胞线粒体膜电位以及减少ROS生成来保护血管内皮细胞缺氧损伤,其中XSXH作用最强。