萤火虫荧光素酶基困的反义RNA及其缺失片段阻抑基因表达的研究

摘要

利用离体转录载体ｐＳＰ１８、ｐＧＥＭ－３Ｚ和萤火虫荧光素酶基因（Ｌｕｃ）及其缺失片段构建了一组融合质粒。以这些质粒为模板，通过离体转录产生荧光素酶基因的ｍＲＮＡ，反义ＲＮＡ及大小和结构不同的反义ＲＮＡ缺失片段，再通过显微注射分别将其引入爪赡卵母细胞的细胞质。注射后的卵母细胞经一定时间培育，然后检测其翻译产物一荧光素酶的相对活性。结果表明，荧光素酶基因的表达受反义ＲＮＡ及其缺失片段的严重阻抑，表达抑制和反义ＲＮＡ之间存在明显的剂量效应。而且，基因表达的抑制程度主要的和反义ＲＮＡ片段的结构有关。