重组人骨形态发生蛋白7对原发性开角型青光眼小梁网细胞增殖的影响

摘要

目的 建立原发性开角型青光眼(POAG)小梁网细胞体外原代培养体系;分析不同终浓度重组入骨形态发生蛋白7 (rhBMP7)对POAG小梁网细胞增殖的影响;探讨rhBMP7与POAG发生、进展的相关性. 方法 取术中切除的带小梁网组织块(未使用丝裂霉素C),进行体外原代及传代培养,取3代小梁网细胞,在CFDA SE标记后,分别加入终浓度为0(对照组),20,50,80,100,200 ng/mL的rhBMP7无血清培养基,采用CCK8、荧光显微镜、流式细胞仪等方法检测POAG小梁网细胞增殖情况. 结果 细胞经传代培养,经鉴定为POAG小梁网细胞;采用CCK8法检测发现:经终浓度为0(对照组),20,50,80,100,200 ng/mL的rhBMP7处理后,POAG小梁网细胞吸光度(OD值)分别为:(0.561 2±0.026 9),(0.724 2±0.039 3),(1.416 0±0.016 2),(1.740 4±0.039 2),(1.853 8±0.014 5),(1.936 4±0.054 6);实验组细胞增殖率分别为1.37％,2.96％,3.70％,3.96％,4.15％;实验组与对照组及各实验组间增殖率比较,差别具有统计学意义(P＜0.05);荧光显微镜示:随着rhBMP7终浓度的增加,经CFDA SE标记的POAG小梁网细胞荧光染色变浅、细胞量及密度增加;采用流式细胞仪检测经20,50,80,100,200 ng/mL终浓度rhBMP7干预的POAG患者小梁网细胞,分裂、增殖细胞所占的比例分别为17.85％,18.63％,20.10％,27.45％,72.41％. 结论 运用组织块培养法,可体外原代培养出POAG患者的小梁网细胞;rhBMP7在一定程度上可促进POAG小梁网细胞的增殖,且在一定范围内呈剂量依赖性.