用谷胱甘肽－S－转移酶融合蛋白系统表达人肿瘤坏死因子

摘要

将人肿瘤坏死因子基因插入表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ的谷胱甘肽－Ｓ－转移酶基因下游，转化Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９．挑选正确克隆培养，用异丙基硫代半乳糖苷诱导后，在Ｔａｃ启动子作用下，可表达出一条４３ｋＤ（Ｍｒ４３０００）的融合蛋白，表达量占细菌总蛋白的１６．７％。用粗制凝血酶消化未经纯化的细菌蛋白，取上清可溶性组分进行活性鉴定，表明用此系统每升细菌培养可得肿瘤坏死因子活性５×１０６Ｕ．