钙激活氯离子通道在气道杯状细胞合成黏蛋白中的促进作用

摘要

目的 :探讨人激活Cl 通道I型 (hCLCA1 )在气道杯状细胞合成黏蛋白中的调控作用 .方法 :以人气道黏液上皮细胞系NCI H2 92作为杯状细胞特性研究的体外模型 ,构建携带荧光蛋白标签的真核表达质粒 pIRES2 EFGP/hCLCA1 ,转染NCI H2 92细胞 ,用G4 1 8筛选稳定表达hCLCA1的细胞NCI H2 92 /hCLCA1 .对被转染细胞采用荧光显微镜和RT PCR法检测hCLCA1mRNA .根据NFA(hCLCA1阻断剂 )干预与否 ,将细胞分为 4组 :①NCI H2 92 ;②NCI H2 92 /hCLCA1 ;③NCI H2 92 +NFA ;④NCI H2 92 /hCLCA1 +NFA .MTT法检测各组细胞的增殖活性 ;PAS特染法检测各组细胞黏液糖蛋白的表达状况 ,RT PCR法检测黏蛋白MUC5ACmRNA水平 .结果 :经过 5 0 0 g/L的G4 1 8筛选 ,证实获得NCI H2 92 /hCLCA1细胞 .对各组细胞检测结果表明 ,NCI H2 92 /hCLCA1细胞的增殖活性、黏液糖蛋白表达量及MUC5ACmRNA水平均显著高于亲本细胞 ,并且NFA能有效抑制NCI H2 92 /hCLCA1的这些生物活性改变 .结论 :hCLCA1能有效促进气道杯状细胞的增殖能力及黏蛋白合成 。