用地高辛标记的PCR-ELISA技术快速检测转基因鱼

摘要

取含有小鼠重金属螯合蛋白(mMT)基因启动子及人生长激素(hGH)基因的鱼样品,以Qiagene核酸纯化技术对鱼组织DNA进行纯化.常规PCR检测显示,mMT启动基因和hGH基因的PCR产物分别为240 bp和130 bp,与设计相符.PCR产物的核酸测序结果证实其扩增产物具特异性.地高辛-PCR(Dig-PCR)标记反应显示,2个基因均产生1条Dig标记的特异产物带.Dig-PCR-ELISA检测敏感性试验显示,对mMT启动子和hGH基因的检测敏感性可达10-3,与常规PCR结合琼脂糖凝胶电泳检测方法相比,检测敏感性可提高至100～1 000倍.试验证明,针对mMT和hGH基因所建立的Dig-PCR-ELISA技术特异可靠.