鲮鱼DAF和DNA谱带的快速银染检测

摘要

利用20个高GC含量的8 bp的随机引物开展野生鲮鱼(Cirrhina molitorella)DNA扩增指纹的研究,以建立鲮鱼DNA扩增指纹(DAF)技术,包括引物设计,PCR反应条件的设置.结果显示,DAF引物浓度相对较高,最佳引物浓度为3.5 μmol/L.DAF 引物pn-16(GCGACCTG)扩增表明,DAF有好的重复性,引物pn-16扩增特征性谱带可用于鉴定鲮鱼.DAF扩增产物可揭示鲮DNA的多态性.同时建立了DNA尿素-聚丙烯酰胺凝胶银染快速检测技术和最佳银染参数,银染检测大约需要1 h,建立包括固定、漂洗、染色、显色、停显色的银染程序和尿素-聚丙烯酰胺凝胶湿法与干法的保存方法.