半滑舌鳎孕酮受体膜组分1基因的克隆及组织和时空表达规律

摘要

运用同源克隆和RACE方法获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)孕酮受体膜组分1(PGRMC1)的cDNA全长序列,生物信息学分析显示,半滑舌鳎PGRMC1 cDNA序列全长1335bp,开放阅读框长546 bp;其编码的蛋白是单次跨膜蛋白,在N端13～35位氨基酸残基处有一个跨膜区域.半滑舌鳎PGRMC1氨基酸序列与青鳉(Oryzias latipes)相似性最高,达到了82.9％;与青斑河鲀(Tetraodon nigroviridis)相似度为81.2％.系统进化分析表明,半滑舌鳎PGRMC1与鳉形目和鲀形目鱼类PGRMC1聚为一个分支.采用实时荧光定量RT-PCR技术研究发现,性成熟雌性半滑舌鳎PGRMC1 mRNA在各组织广泛表达,其中在卵巢组织中相对表达量最高(P＜0.05).在不同卵巢发育时期,半滑舌鳎PGRMC1 mRNA在脑、垂体和卵巢中的周期表达变化特征显示:脑中PGRMC1 mRNA在卵巢Ⅲ期表达量升高明显,Ⅴ期表达水平最高(P＜0.05);垂体中PGRMC1 mRNA表达量在卵巢发育Ⅴ期达峰值(P＜0.05);在卵巢中,PGRMC1 mRNA表达水平从卵巢发育Ⅱ到Ⅴ期稳步上升,Ⅴ期时达到最高值(P＜0.05).综上,半滑舌鳎PGRMC1基因主要参与卵巢的发育和成熟过程,并在繁殖期介导孕酮调控卵母细胞的最终成熟,研究结果为半滑舌鳎繁殖内分泌调控研究提供了基础资料.