缢蛏2-CRD型半乳糖凝集素(Galectin)基因的克隆和表达分析

摘要

利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了缢蛏半乳糖凝集素基因(ScGL).ScGL全长为1282 bp,5'非编码区35 bp,3'非编码区329 bp,开放阅读框(ORF)918 bp,编码305个氨基酸.氨基酸序列分析显示,ScGL无跨膜结构域,与已报道的缢蛏半乳糖凝集素含1个糖识别结构域(CRD)不同,ScGL具有2个CRD.相似性分析显示,ScGL与其他软体动物的半乳糖凝集素具有较高的相似性,与菲律宾蛤仔相似性最高,达65％;与已报道的2个缢蛏半乳糖凝集素相似性分别为39.74％ 和44.76％.系统进化上ScGL与菲律宾蛤仔半乳糖凝集素聚为一支.重组表达发现ScGL在包涵体表达,分子量约34.4 ku.荧光定量PCR分析显示,ScGL在缢蛏鳃、肠、唇瓣、外套膜、出水管、入水管、足和内脏团中均表达;其中肠、内脏团、唇瓣和足中表达量较高,出水管和入水管中表达量最低.消化腺ScGL表达量分别在金黄色葡萄球菌感染后3 h和48 h显著高于对照组;鳃ScGL表达量分别在鳗弧菌和金黄色葡萄球菌感染后6 h和48 h显著高于对照组,说明ScGL参与了病原体诱导的缢蛏免疫应答.本研究为深入探索ScGL在缢蛏免疫中的作用奠定基础.