马氏珠母贝精子的超低温保存

摘要

通过比较不同pH值(5.5～9.5)、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响,选择其中无激活精子作用又对其生理特性(活力,寿命,受精能力等)无影响者,加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液,精液与保护液按1:10和1:20的比例混合,样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻,比较其超低温冻存的效果.结果表明:以海水(pH 7.5～8.0)为基础液,配制10% DMSO作为抗冻保护液,精液与保护液比例为1:20,在低温(0～4 ℃)中平衡约30 min,在距液氮面15 cm、5 cm处分别停留5 min、10 min后转入液氮(-196 ℃),冻存精子效果良好.冷冻24 h、48 h及5个月后,在38～40 ℃下水浴解冻复苏后,用终浓度0.25‰的氨海水刺激,精子存活率可超过60%,受精率可达80%.