土壤中单宁和植酸降解菌的筛选、鉴定及液态发酵研究

摘要

为从土壤中筛选能够同时降解单宁和植酸的微生物,本实验利用富集培养技术,分离、筛选、鉴定土壤中的单宁和植酸降解菌,并研究其在液态发酵下的产酶能力.结果显示,从土壤中共获得109株纯菌落,包括39株细菌、46株酵母菌以及24株霉菌.分别用单宁筛选性培养基和植酸筛选性培养基筛选上述菌株,获得27株植酸降解菌和14株单宁降解菌,其中霉菌M-6、M-3和M-1可以同时分解单宁和植酸,且霉菌M-6的水解圈直径大于M-3和M-1.在液态发酵条件下,随着发酵温度的升高(20～35℃),霉菌M-6产单宁酶和植酸酶的活力呈现先升高而后降低的趋势,在发酵温度为30℃时达到最高值(P＜0.05).随着发酵pH的升高(pH 4～7),霉菌M-6产单宁酶和植酸酶的活力呈先升高后降低的趋势(P＜0.05);其中单宁酶活力在发酵pH值为5时达到最高值,显著高于其他处理组(P＜0.05);而植酸酶活力在发酵pH值为5时达到最高值,显著高于发酵pH 4和7处理组(P＜0.05),但与发酵pH 6处理组差异不显著(P＞0.05).通过菌落和菌株形态学以及分子测序方法,鉴定M-6为黑曲霉.因此,本研究从土壤中分离筛选出3株(M-6、M-3和M-1)能够同时水解单宁和植酸的降解菌,在液态发酵条件下,黑曲霉M-6产单宁酶和植酸酶的最佳发酵温度为30℃,最佳发酵pH值为5.